Examen + Correction Optique / Microscopie – 2004 – N°1

Thèmes :

Question de cours : Microscopie par fluorescence de type confocal

Exercice : Longueur d’onde / Dilution / Critère de Raileigh / Agrégation des fluorophores

Extrait :

Question de cours – Quel est le principe de la microscopie par fluorescence de type confocal ?
Exercice – On désire préparer 10 micro litre d’une solution de fluorophores individuels sur une lamelle de 22 par 22 mm. On utilise un objectif x100 d’ouverture numérique N.A. = 1.4, une source lumineuse de longueur d’onde mu = 514 nm, et la solution mère est à 2 micro mètre. Quelle dilution doit-on employer pour qu’ils soient séparés d’une distance supérieure à la limite de résolution ? (Rappel : selon le critère de Raileigh, dmin = 1.22 lambda/ 2.N.A.) Dans quel sens le calcul évolue-t-il si l’on tient compte d’une possible agrégation des fluorophores ?

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